血液及骨髓标本的细菌学检验操作规程SOP微-001

第一篇：血液及骨髓标本的细菌学检验操作规程SOP微-001

单位及实验室名称 项 目

汉源县人民医院检验科 血液及骨髓标本的细菌学检验操作 编号：LAB/SOP/HY/微-001 日期：2010年5月3日

版本：第一版，第0次修订

第1页，共3页

一、【标本采集】

1.血液采集：（1）以无菌方法采血，采出的血液标本立即注入适当的液体增菌培养基内，迅速轻摇，使之充分混匀，以防止凝固。（2）采血量：增菌液与血液标本比例为5-10：1，成人一次采血8-10ml，婴幼儿1-5ml。

2.骨髓标本：（1）采集部位及时间：一般用骨髓穿刺针从髂骨采集骨髓标本，最好在用药前，发热患者要在发热初期或高热期采集标本。（2）标本采集要严格无菌操作，增菌与运送同血液标本。

二、【检验方法】

1.培养：标本接种于肉汤增菌液后，立即置35℃孵箱内孵育，每天观察培养液内有无混浊、沉淀菌膜、色素颜色变化等。肉汤出现变化 怀疑菌种 混浊 革兰氏阴性杆菌 均匀混浊，有绿色荧光 绿脓杆菌 上面澄清，下面沉淀 链球菌 自下而上溶血现象 溶血性链球菌 肉栋样凝固 葡萄球菌

表面有灰白菌膜 枯草杆菌或类白喉杆菌 2.检验：对有细菌生长迹象的血培养瓶应及时做如下检验

（1）以无菌操作挑取培养物涂片进行革兰氏染色镜检，一旦有细菌生长可向临床作初步报告。

（2）同时转种于血平板或其它培养基进行分离培养。

（3）根据菌落特征及菌体染色镜检形态，进行常规生化反应，同时做药敏试验。

三、【检验程序】

血液、骨髓

↓

增菌培养（需氧及厌氧）

↓

———————————————————————————— ↓ ↓ ↓ 涂片染色镜检 分离培养 直接药敏试验 ∣ ↓

（35℃ 4-6小时）初步报告

↓

↓ ↓ 需氧培养及CO2环境培养 厌氧培养（血平板

等分离培养基）

（血琼脂平板和巧克力平板）∣——————————菌落观察—————————∣

↓

↓ ↓ 涂片、革兰氏染色镜检

纯培养

↓

———————————————————

↓ ↓

血清学检查→确定报告←生化反应试验、药敏试验

四、【结果报告】

1.根据增菌液培养结果直接直接涂片、染色、镜检确属致病菌时可向临床做初步报告，最后根据细菌鉴定结果及药敏试验及时向临床报告。

2.培养7天无菌生长时，可报告为“经7天培养无细菌生长”。对于亚急性心内膜炎患者标本应培养1个月，才能做出报告。

3.菌血症、败血症的诊断标准：（1）两次培养均出现同一细菌（可排除污染）；（2）发病2周后血中抗体滴度增高。

作者：肖德慧

时间：2010-5-3 3

第二篇：脑脊液标本的细菌学检验操作规程

单位及实验室名称 项 目

汉源县人民医院检验科 脑脊液标本的细菌学检验操作 编号：LAB/SOP/HY/微-007 日期：2010年5月3日

版本：第一版，第0次修订

第1页，共3页

一、【标本采集】

脑脊液的采集由临床医师以无菌操作腰穿采取脑脊液3-5ml，置于无菌试管内立即送检。如做厌氧菌培养，则需将注射器针头封口，立即送检。

二、【检验方法】

1、一般细菌的培养

（1）一般细菌培养主要适用于脑脊液内的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和大肠杆菌等的分离培养。

（2）用无菌接种环挑取混浊脑脊液或经离心的沉渣，非别接种于血平板和普通肉汤培养基。经35℃培养，观察有无细菌生长。若有细菌生长，挑取可疑菌落，并涂片染色镜检。根据菌落特征、细菌形态、染色特点得出初步印象，再进一步鉴定，然后做出报告。若血平板无细菌生长，肉汤有细菌生长，则移种于血平板分离培养，按上述方法鉴定。如血平板、肉汤均无细菌生长，再延长培养数天，仍无细菌生长时，即可报告：“经培养×天无细菌生长。” 2.脑膜炎奈瑟菌的培养

以无菌方法取脑脊液，经3000r/min，离心30min，取沉淀物立即接种于事先预温的巧克力或血平板上，置于5%-10%CO2环境中，经35℃ 培养18-24小时后，观察结果。若发现平板上有光滑、湿润、透明、边缘整齐、粘性的中等大小的菌落，经革兰染色为阴性双球菌者，可做出初步报告：“有脑膜炎奈瑟菌生长”。经纯培养后做糖发酵、氧化酶试验、自凝试验、血清玻片凝集试验、乳胶凝集以做出最后的鉴定。3.新型隐球菌的培养

以无菌方法采取脑脊液标本，经离心沉淀后，取其沉淀物接种于沙保弱氏斜面或血平板培养基上，分别置于37℃及25℃培养。数日后可见有白色或淡褐色酵母样的菌落（如培养较久、菌落则变为湿润、粘液状），如果此时菌落用墨汁染色法染色镜检，可见有出牙的细胞及短芽管（培养时间过长则芽管可消失，荚膜形成）。杆菌菌落及染色镜检特征，可做出初步报告：“真菌培养有新型隐球菌生长。”必要时再做生化反应及动物试验等进一步鉴定。

三、【检验程序】 脑脊液

↓ ↓ ↓ 离心涂片染色 分离培养 结核杆菌检查 镜检 ———————— ——————

↓ ↓ ↓ ↓

厌氧环境培养 普通及

5%-10%CO2培养

罗氏培养基培养 取沉淀物

涂片抗酸染色

↓ ↓35℃18-24h ↓35℃3-4W

————————————————

↓

菌落观察

↓ ↓ ↓ 生化反应 → 血清学检查 ← 自动化鉴定

↓

药敏试验

↓

报告结果

作者：肖德慧

时间：2010-5-3 3

第三篇：实验一 粪便标本的细菌学检验

课程名称：微生物学检验技术 授课专业：医学检验 学时：4学时

实验一

粪便标本的细菌学检验

一、实验目的

⒈熟悉粪便标本的采集方法与注意事项。⒉掌握粪便标本的细菌学鉴定方法。

二、试验器材

粪便

培养基

接种环

酒精灯 显微镜

抗血清等

三、实验内容

㈠标本的采集：

多见于急性腹泻及用药前采用自然排便法采集，也可用直肠拭子法采集。⒈自然排便法：取新鲜的粪便2-3克放无菌容器内立即送检，挑取脓血粘液便，液体粪便取絮状物。

⒉直肠拭子法：排便困难患者或幼儿，将拭子前端用无菌生理盐水或甘油湿润，然后插入肛门约4-5厘米（幼儿2-3厘米），轻轻在直肠内旋转，取其粘液放于无菌试管中送检。

⒊注意事项： ⑴在用药前采集

⑵注意无菌操作，防止杂菌污染，用无菌的广口瓶或洁净的容器装 ⑶及时送检和接种

⑷标本用完后及时进行消毒处理，防止实验室污染。㈡检验程序

粪便或肛拭子

↓

分离培养

SS MAC

↓35℃

24小时

观察细菌生长情况

Gs染色镜检

纯培养（KIA）药敏试验

↓35℃24小时

需氧培养

厌氧培养

KIA.MIU 初步生化反应查编码

氧化酶

↓

四、实验安排

制作培养基

第一台SS平板16个，第二台MAC

16个，第三台双糖铁16支，五、实验准备

无菌中号试管 32无菌小号试管 16无菌中号平板 32SS 32*20MAC

KIA

枸橼酸盐

蛋白胨水 16葡胨水

尿素培养基 16半固体 1620%葡萄糖

0.4%酚红 150%尿素 1血清学鉴定

↓ 报告结果

葡萄糖蛋白胨水 32支

尿素16支

蛋白胨水16支

支／班 支*5／班 ／班 毫升／班 32*20毫升／班 16支*3毫升／班 16支*3毫升／班 支*2毫升／班 16支*2*2毫升／班 支*2毫升／班 支*2毫升／班 1瓶/教室 瓶/教室 瓶/教室

枸橼酸盐16支半固体16支

无菌5ml吸管 2筒 无菌1ml吸管 2筒

第四篇：血液常规检验标准操作规程

昆仑泌尿外科医院检验科 临检室作业指导书

文件编号；SZKL-LJ-01

版本/修订号；1/0

主题内容

血液常规检验标准操作规程

生效日期：20150101 页码；

血液常规检验标准操作规程 1.目的: 检测分析血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白等的数量和质量，对感染、炎症、血液系统疾病等进行辅助诊断、监测治疗效果等。2.检测项目: 迈瑞BC-2600全自动血球仪上测定血常规19项。包括：白细胞计数(WBC)、中性粒细胞数(Neut#)、淋巴细胞数(Lymph#)、中间细胞计数（MID#）、中性粒细胞比率(Neut%)、淋巴细胞比率(Lymph%)、中间细胞比率（MID %)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、红细胞压积(Hct)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度变异系数（RDW-CV）、红细胞体积分布宽度标准差（RDW-SD）、血小板计数(PLT)、平均血小板体积（MPV）、血小板体积分布宽度（PDW）、血小板压积（PCT）。3.原理：

3.1 血细胞(WBC.RBC.PLT)数量和体积检测原理：电阻抗法。3.2白细胞分类原理：电阻抗法。白细胞脉冲的大小是由被计数细胞在溶血素中大小决定的。3.3 血红蛋白测定：采用氰化高铁血红蛋白(HICV)比色法。

3.4 RDW、MCH、MCV、MCHC、MPV、PCT、PDW为换算项目。

3.5 HCT测定原理：血细胞产生的脉冲信号的峰值与RBC容积成正比。4.仪器：

厂商名：深圳迈瑞公司。型号：BC-2600。5.试剂：

厂商名：深圳迈瑞公司。

5.1清洗液：注册号：粤深药临械（准）字2013

7.6 观察仪器测定结果及直方图，必要时应手工计数及白细胞分类。7.7 审核结果，打印报告。

8．血细胞的显微镜检查(用于对仪器法结果可疑时的复核)8.1 镜检标准

8.1.1 医生明确要求涂片镜检；

8.1.2 仪器提示有原始或幼稚细胞、变异淋巴细胞、有核红细胞等异常需镜检； 8.1.3 新生儿标本需涂片镜检；

8.1.4 WBC≥20×10^9/L或≤2.0×10^9/L；

8.1.5淋巴细胞≥45%，需做涂片镜检，1-4岁儿童且血细胞计数及他结果正常者除外； 8.1.6 单核细胞≥15%；

8.1.7 嗜酸性粒细胞≥10%； 8.1.8 嗜碱性粒细胞≥3% 8.1.9 PLT＞500×10^9/L或＜60×10^9/L； 8.2.0 提示有PLT聚集，需涂片镜检； 8.2 镜检步骤

8.2.1 血涂片的制备

8.2.1.1 在距载玻片一端1cm的位置滴加约5µl的抗凝血；末梢血直接用干净玻片蘸取。8.2.1.2 用推片使血液沿其边缘展开，与载玻片30～40度角进行推片。8.2.1.3 涂片完成后在空气中自燃晾干。8.2.2 血涂片的染色

8.2.2.1 染色试剂：瑞氏染色液。8.2.2.2 染色步骤

a.用蜡笔在血膜两头画线，然后将血涂片平放在染色架上。b.加瑞氏染液数滴，以覆盖整个血膜为宜，染色约1分钟。c.滴加约等量的缓冲液与染液混合，室温下染色5-10分钟。d.用流水冲去染液，待干燥后镜检。8.2.2.3 镜检观察要求

a.将湿片在高倍镜下观察涂片、染色是否良好，否则重新涂片染色。b.选择涂片体尾交界、细胞分布均匀不重叠部分进行镜检。c.在高倍镜下辨认细胞不清楚时，必须待玻片干后用油镜观察。8.2.2.4 镜检观察的处理

a.根据仪器报警提示的内容，确认镜下观察结果是否与仪器提示一致。

b.发现原始及幼稚白细胞，则必须进行手工分类；如不能确定细胞种类，则报告异常细胞的比例。

c.如果镜下发现有核红细胞，则必须对白细胞进行校正。

d.如果镜下观察有血小板聚集，则必须手工冲池计数血小板；如果是EDTA﹒K2引起的血小板聚集，可用109mmol/L枸橼酸钠抗凝剂采集标本，结果需要进行换算。

e.多发性骨髓瘤、冷球蛋白血症引起的红细胞聚集，可将血液用仪器稀释液稀释3倍，然后37℃水浴箱中10分钟后，立即上机检测，结果需要进行换算。昆仑泌尿外科医院检验科 临检室作业指导书

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血液常规检验标准操作规程

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9．参考区间

中国成年人群血细胞分析参考区间（静脉血标本仪器法）测定项目男

女

WBC（×10^9/L）

3.5～9.5

3.5～9.5 Neut（×10^9/L）

1.8～6.3

1.8～6.3 Lymph（×10^9/L）

1.1～3.2

1.1～3.2 Neut%

40～75

40～75 Lymph%

20～50

20～50 RBC（×10^12/L）

4.3～5.8

3.8～5.1

Hb（g/L）

130～175

115～150 HCT（%）

0.40～0.50

0.35～0.45 MCV（fl）

82～100

82～100 MCH（pg）

27～34

27～34 MCHC（g/L）

316～354

316-354 PLT（×10^9/L）

125～350

125～350 10．危急值 测定项目≤≥

WBC（×10^9/L）

1.0

Hb（g/L）

180 PLT（×10^9/L）

600 11．临床意义

11.1 白细胞计数：

11.1.1 生理性变化：白细胞计数结果有明显的生理性波动，如早晨较低，傍晚较高；餐后较餐前高；剧烈运动、情绪激动时较安静时偏高；月经期、妊娠、分娩、哺乳期亦可增高；新生儿及婴儿期明显高于成人。11.1.2 病理性增多，常见于：

11.1.2.1 急生化脓性感染，尤其是革兰阳性球菌感染（脓肿、脑膜炎、肺炎、扁桃体炎、阑尾炎）

11.1.2.2 某些病毒性感染：传染性单核细胞增多症、流行性乙型脑炎等。11.1.2.3 组织损伤：严重外伤、大手术、大面积烧伤、急性心肌梗死等。11.1.2.4 急性大出血 11.1.2.5 白血病

11.1.2.6 恶性肿瘤：肝癌、胃癌、肺癌等。11.1.3

病理性减少，见于：

11.1.3.1 某些感染性疾病，尤其是革兰氏阴性杆菌感染（伤寒、副伤寒等）。11.1.3.2 某些病毒感染：流感、病毒性肝炎等。11.1.3.3 某些原虫感染，如疟疾、黑热病等

11.1.3.4 某些血液病：再生障碍性贫血、急性粒细胞缺乏症、巨幼细胞贫血等。11.1.3.5 自身免疫性疾病：SLE、AIDS等。11.1.3.6 脾功能亢进：门脉肝硬化 昆仑泌尿外科医院检验科 临检室作业指导书 文件编号；SZKL-LJ-01

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血液常规检验标准操作规程

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11.1.3.7 肿瘤化疗、放疗及某些药物（氯霉素、磺胺类药等）反应等。

11.2 中性粒细胞：中性粒细胞增多分生理性和病理性增多。病理性增多可见于急性感染或炎症、急性失血、急性中毒及恶性肿瘤等；中性粒细胞减少可见于病毒感染、慢性理化损伤、自身免疫性疾病等。

11.3 淋巴细胞：淋巴细胞病理性增多见于某些慢性感染、肾移植手术后、白血病、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等；淋巴细胞减少可见于接触放射线，应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素，严重化脓性感染等情况。11.4 红细胞和血红蛋白：

11.4.1减少见于：急、慢性红细胞丢失过多、红细胞寿命缩短、造血原料不足、骨髓造血功能减退等；

11.4.2增多见于：真性红细胞增多症，肺心病等。

11.5 红细胞比积：增高可见于大面积烧伤、脱水等血液浓缩情况；减低可见于贫血。11.6 红细胞体积分布宽度（RDW）

11.6.1用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察，缺铁性贫血时RDW值增大，当给以铁剂治疗有效时RDW值一过性进一步增大，随后逐渐降到正常。

11.6.2对小细胞低色索性贫血的鉴别诊断.缺铁性贫血时RDW值增大而轻型海洋性贫血时RDW值正常。

11.6.3用于对贫血的分类(Bassman MCV/RDW分类法)，根据MCV、RDW值变化共分为6种类型贫血。

A.小细胞均一性贫血：MCV减小，RDW正常，如轻型海洋性贫血。

B.小细胞不均一性贫血：MCV减小，RDW增大，如缺铁性贫血。

C.正细胞均一性贫血：MCV、RDW均正常，如慢性病所致贫血。

D.正细胞不均一性贫血：MCV正常，RDW增大，如早期缺铁性、营养性贫血。

E.大细胞均一性贫血：MCV增大，RDW正常，如再生障碍性贫血。

F.大细胞不均一性贫血MCV、RDW均增大，如巨幼细胞性贫血。

11.7 MCV、MCH、MCHC：这三个参数通常都用于各型贫血的诊断，具体应用如下表： 贫血类型

MCV（82～100）

MCH(27～34)MCHC(316～354)

常见原因及疾病

正常细胞性贫血正常正常正常急性失血、急性溶血、再生障碍性贫血、白血病等

大细胞性贫血＞正常＞正常正常叶酸、维生素B12缺乏或吸收障碍 单纯小细胞性贫血＜正常＜正常正常慢性炎症、尿毒症

小细胞低色素性贫血＜正常＜正常＜正常铁缺乏、维生素B6缺乏、珠蛋 白肽链合成障碍、慢性失血

11.8 血小板：血小板数量病理性减低见于性白血病、再障、脾亢、血小板减少性紫癜、败血症等；增高见于慢性白血病、真性红细胞增多症、急性化脓性感染、脾切除、溶血性贫血等。

11.9 MPV：研究表明MPV的大小与PLT的多少呈非线性负相关，故在分析MPV的临床意义时应结合PLT的变化来考虑。

11.9.1鉴别血小板减少症的病因：骨髓损伤导致血小板减少时，MPV下降；当血小板在外周血中破坏增多导致血小板减少时，MPV增大；当血小板分布异常导致血小板减少时，MPV正常。

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血液常规检验标准操作规程

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11.9.2 MPV增高可作为骨髓功能恢复的较早期指标。当骨髓功能衰竭时，MPV与PLT同时持续下降，骨髓抑制越严重，MPV越小，当骨髓功能恢复时，MPV值的增大先于PLT数值的增高。

11.9.3血栓前状态或血栓性疾病时MPV常增高。

12.0 PCT的临床应用报道尚少。在血小板增多症、慢性粒细胞性白血病早期PCT常增大。12.1 PDW的增大可能与骨髓巨核细胞的倍体数增大等有关，其临床应用尚较少。12.注意事项：

12.1 采血时，加入到抗凝管后，应注意充分混匀，避免血液凝固。混匀时，动作要轻，避免血液有形成分破坏。

12.2 样本测定前，应注意充分混匀，方法如下：①将血样瓶口朝上置于操作者双手掌心，双手来回搓动10次，动作要连贯。②颠倒小瓶，使瓶口朝下，将血样置于操作者双手掌心，双手来回搓动10次。③重复①和②步骤8次。④轻轻颠倒混匀1分钟左右。12.3 为保证结果准确性，应做好仪器的保养和校准(见保养和校准程序)。12.4 仪器有报警提示或直方图有异常时，应进行手工方法复查。当WBC>1O.O X10^9／L或<3.0X10^9/L时，应推片瑞氏染色，镜下复查白细胞分类、形态。当RBC<3.0X10^9／L或PLT<50x10^9／L时，应进行手工方法镜检复查。12.5 建议使用仪器配套的试剂。

12.6 样本应在采血后2分钟至4小时内检测完成。

12.7 血液与抗凝剂的比例要适当，lml血液用1.5-2.0mg的EDTA-K2抗凝。

12.8 MID包括单核细胞、嗜酸细胞、嗜碱细胞、幼稚细胞；当MXD>13%时，应推片瑞氏染色，镜下复查白细胞分类、形态。12.9失控处理：当出现失控现象时，按失控处理程序，寻找失控原因，并扣留该批检测结果，待查明失控原因并排除后重测样本，然后才发出报告。13.参考文献 11.1尚红、王毓

三、申子瑜主编，全国临床临验操作规程（第4版），人民卫生出版社，2015.

第五篇：血液常规检验标准操作规程

贵州省盘县中医院检验科SOP文件

血液常规检验标准操作规程

1．目的:检测分析血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白的数量和质量，对感染、炎症、血液系统疾病等进行辅助诊断、监测治疗效果等。

2．检测项目:红细胞计数、血红蛋白、红细胞比积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、白细胞计数、白细胞分类、血小板计数。

3．标本的采集与运送

3.1 标本类型：静脉血或手指末梢血。3.2标本要求：标本用EDTA-K2 抗凝； 静脉血标本量应达到2ml；末梢血20µl。3.3标本运送：室温运送，4小时内完成检测。

3.4标本拒收标准：严重溶血、凝固、血量少、无条码、无标识的血液标本不能进行检测。

4．标本的检测 仪器及试剂

4.1 仪器：深圳mindrary公司BC—5100全自动血液细胞分析仪。试剂：由mindrary公司提供包括LH溶血剂、LEO(Ⅰ)溶血剂、LBA溶血剂、LEO(Ⅱ)溶血剂、清洁液、稀释液、探头清洁液等配套试剂。

4.1.1 检测原理

贵州省盘县中医院

贵州省盘县中医院检验科SOP文件

采用流式细胞技术，通过检测光学信号进行白细胞计数及白细胞分类测定；双鞘流电阻原理进行红细胞与血小板测定；HiCN-HGB法检测血红蛋白。

4.1.2 操作步骤 4.1.2.1开放-全血模式

a.在仪器主界面点击“计数”，进入计数界面。

b.点击计数界面“模式”，在弹出的对话框中选择“开放全血模式”。输入分析标本的试管号，点击“CBC+DIFF测量模式”。

c.上下颠倒试管将试管内容物充分混匀，轻轻取下盖子，防止血液溅出。

d.将试管放到采样针下，按吸样键，蜂鸣器响后移走试管，仪器自动执行样本分析。

e.分析结束，结果显示在屏幕的分析结果区同时自动传入电脑。4.1.2.2自动-全血模式

a.在仪器主界面点击“计数”，进入计数界面。

b.点击计数界面“工作模式”，在弹出的对话框中点击模式项的“自动—全血”按钮，进样模式为自动进样，血样模式为全血。点击“CBC+DIFF”测量模式。

c.在“管架号”、“试管号”编辑框中输入起始样本的对应管架号和试管号。点击“确定”按钮，保存输入内容并返回计数界面。

c.将分析标本试管放入对应的试管位，将试管架放入进样器右槽。

贵州省盘县中医院

贵州省盘县中医院检验科SOP文件 d.点击计数界面“开始计数”，至分析结束。e.分析完毕，结果直接传入电脑。4.1.3 室内质量控制

4.1.3.1 质控品：由mindrary公司提供的配套质控品。4.1.3.2 操作方法：选择“开放—全血”模式，质控品编号9000，计数状态为绿色图标。将充分混匀的质控品放到采样针下，使采样针可吸入混匀后的质控物。

按吸样键，听到蜂鸣器响后移开质控物。质控分析结束后，质控结果自动传入电脑。

5．血细胞的显微镜检查 5.1 镜检标准

5.1.1 医生明确要求涂片镜检；

5.1.2 仪器提示有原始或幼稚细胞、变异淋巴细胞、有核红细胞等异常需镜检；

5.1.3 新生儿标本需涂片镜检； 5.1.4 WBC≥20×109/L或≤2.0×109/L；

5.1.5淋巴细胞≥45%，需做涂片镜检，1-4岁儿童且血细胞计数及他结果正常者除外；

5.1.6 单核细胞≥15%； 5.1.7 嗜酸性粒细胞≥10%； 5.1.8 嗜碱性粒细胞≥3% 5.1.9 PLT＞500×109/L或＜60×109/L；

贵州省盘县中医院

贵州省盘县中医院检验科SOP文件 5.2.0 提示有PLT聚集，需涂片镜检； 5.2 镜检步骤 5.2.1 血涂片的制备

5.2.1.1 在距载玻片一端1cm的位置滴加约5µl的抗凝血；末梢血直接用干净玻片蘸取。

5.2.1.2 用推片使血液沿其边缘展开，与载玻片30～40度角进行推片。

5.2.1.3 涂片完成后在空气中自燃晾干。5.2.2 血涂片的染色

5.2.2.1 染色试剂：瑞氏快速染液。5.2.2.2 染色步骤

a.干后的血涂片加上瑞氏染液，染色约1分钟。b.再加入等量的缓冲液，染色5～10分钟。c.清水冲洗后，待干后镜检。5.2.2.3 镜检观察要求

a.将湿片在高倍镜下观察涂片、染色是否良好，否则重新涂片染色。

b.选择涂片体尾交界、细胞分布均匀不重叠部分进行镜检。c.在高倍镜下辨认细胞不清楚时，必须待玻片干后用油镜观察。5.2.2.4 镜检观察的处理

a.根据仪器报警提示的内容，确认镜下观察结果是否与仪器提示一致。

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b.发现原始及幼稚白细胞，则必须进行手工分类；如不能确定细胞种类，则报告异常细胞的比例。

c.如果镜下发现有核红细胞，则必须对白细胞进行校正。d.如果镜下观察有血小板聚集，则必须手工冲池计数血小板；如果是EDTA﹒K2引起的血小板聚集，可用109mmol/L枸橼酸钠抗凝剂采集标本，结果需要进行换算。

e.多发性骨髓瘤、冷球蛋白血症引起的红细胞聚集，可将血液用仪器稀释液稀释3倍，然后37℃水浴箱中10分钟后，立即上机检测，结果需要进行换算。

6．生物参考区间

测定项目 男 女 新生儿 WBC（×109/L）4.0～10.0 4.0～10.0 15.0～20.0 RBC（×1012/L）4.0～5.5 3.5～5.0 6.0～7.0 Hb（g/L）120～160 110～150 170～200 HCT（%）40.0～50.0 35.0～45.0 38～68 MCV（fl）80～100 80～100 95～125 MCH（pg）27.0～34.0 27.0～34.0 30～42 MCHC（g/L）320～360 320～360 300～340 PLT（×109/L）100～300 100～300 100～360 7．白细胞分类计数参考值

分类百分率（%）绝对值（×109/L）中性粒细胞50～70 2～7

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贵州省盘县中医院检验科SOP文件 淋巴细胞 20～400.8～4.0 单核细胞 3～8 12～0.80 嗜酸性粒细胞0.5～5 0.02～0.5 嗜碱性粒细胞0～1 0～0.1 8．危急值

测定项目小于或等于大于或等于 WBC（×109/L）≥30.0

≤2.0 儿童（×109/L）≥35.0

≤1.5 Hb（g/L）≥200

≤60 PLT（×109/L）≥600

≤50 9．临床意义

9.1 中性粒细胞：中性粒细胞增多分生理性和病理性增多。病理性增多可见于急性感染或炎症、急性失血、急性中毒及恶性肿瘤等；中性粒细胞减少可见于病毒感染、慢性理化损伤、自身免疫性疾病等。

9.2 淋巴细胞：淋巴细胞病理性增多见于某些慢性感染、肾移植手术后、白血病、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等；淋巴细胞减少可见于接触放射线，应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素，严重化脓性感染等情况。

9.3 单核细胞：单核细胞病理性增多见于急性感染恢复期、活动性肺结核、血液病等；单核细胞减少临床意义不大。

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9.4 嗜酸性粒细胞：嗜酸性粒细胞增多 常见于寄生虫、变态反应疾病、皮肤病、血液病等；嗜酸性粒细胞减少 其临床意义较小，见于长期应用肾上腺皮质激素后，某些急性传染病等。

9.5 嗜碱性粒细胞：嗜碱性粒细胞增多可见于过敏性或炎症性疾病、骨髓增生性疾病；嗜碱性粒细胞减低临床意义不明确。

9.6 红细胞和血红蛋白减少见于急、慢性红细胞丢失过多、红细胞寿命缩短、造血原料不足、骨髓造血功能减退等；红细胞和血红蛋白增多见于真性红细胞增多症，肺心病等。

9.7 红细胞比积增高可见于大面积烧伤、脱水等；减低可见于贫血。

9.8 血小板：血小板数量病理性减低见于性白血病、再障、脾亢、血小板 减少性紫癜、败血症等；增高见于慢性白血病、真性红细胞增多症、急性化脓性感染、脾切除、溶血性贫血等。

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